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    食品微生物檢驗

    大腸菌群平板計數成套試劑

    大腸菌群平板計數成套試劑

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      貨 號: SP002; 單 位: 套;1套產品檢測1個批次的5個樣品。 包 裝: 10套/箱。 每套產品組成: ●大腸菌群平板計數集成平板組1組 ● VRBA培養基(300mL/瓶)1瓶 ●10管組BGLB肉湯管1只

    詳細說明:

                                                    產  品  信  息

    產品名稱    大腸菌群平板計數成套試劑

    貨   號     SP002

    單   位     套;一套產品檢測一個批次的5個樣品。

    包   裝    10套/箱

    每套產品組成

    ●大腸菌群平板計數集成平板組1組   ● VRBA培養基(300mL/瓶)1瓶   ●10管組BGLB肉湯管1只

    產品描述

    1、大腸菌群平板計數集成平板組:每一組由5塊集成平板組成,每塊集成平板含4個方形平皿;1塊平板檢測一個樣品,5塊平板共檢測一個批次的5個樣品。自上而下依次編號為1、2、3、4、5,代表該批次5個樣品的編號,每一個樣品使用一塊集成平板,做兩個連續稀釋度,每個稀釋度兩個平皿;使用前,將該樣品的批次編號標注在集成平板組的標簽區域內,使用時依次自上而下取用集成平板,左手揭開集成平板蓋,右手持無菌吸管將樣品稀釋液加入平皿內,每加完一個樣品后蓋上集成平板蓋,依次自下而上疊加;當加完一個批次的5個樣品后,傾注平板計數培養基;傾注時依次從上而下拿取已經加好樣品的集成平板,每傾注好一塊集成平板,立即在實驗臺上前后左右平移混勻,然后自下而上疊加,待瓊脂凝固后以一組為單位翻轉過來。

     

    2、VRBA培養基(300mL/瓶:使用前經水浴加熱液化并恒溫至48℃備用;每瓶總量為300mL,為1組共5塊集成平板的使用量,每個平皿約15mL。


    3、10管組BGLB肉湯管:用于證實試驗。使用時,左手揭開管蓋,右手持專用開孔器,經火焰消毒并冷卻(或用酒精消毒),在組合管的封膜上連續開孔;用接種環選取1組5個平板上的10個將典型和可疑菌落接種到管內,1管接種1個菌落;經培養后,產氣窗內觀察產氣情況;產氣窗內有氣泡產生者證實為大腸菌群陽性。


                                                                    使 用 方 法


           1.液化培養基:1瓶VRBA培養基水浴液加熱化后恒溫至48℃備用

           2.樣品處理

    2.1.固體樣品和半固體樣品取25g于盛有225mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質杯內經均質處理制成1:10的樣品勻液,再用樣品稀釋管做成1:100和1:1000的或更高稀釋度的連續稀釋度的樣品勻液。

    2.2.液體樣品吸取25mL樣品置于有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶或其他無菌容器中充分振搖,制成1∶10的樣品勻液;再用樣品稀釋管做成1:100和1:1000的或更高稀釋度的連續稀釋度的樣品勻液。

    3.加樣:用移液器吸取兩個連續稀釋度的樣品稀釋液加入集成平板內,一個稀釋度兩個平板,每個平板1mL。注:包裝飲用水采用原液和1:10兩個稀釋度檢驗。

         4. 傾注平板并培養:將液化并恒溫至48℃VRBA培養基傾注集成平;每個平板約15ml,然后在操作臺上將平板前后或左右移動,使培養基和樣品充分混勻,待培養基凝固后翻轉集成平板板置于 36℃±1℃ 培養 18h~24h。

        5. 菌落數選擇選取菌落數在 15CFU~150CFU 之間的平皿,計數平皿上出現的典型和可疑大腸菌群菌落,最低稀釋度平板低于15CFU 的記錄具體菌落數。

           6. 證實試驗:從1組5個集成平板中選取10個不同類型的典型和可疑菌落(不足10個菌落,全部選?。┮来谓臃N于10管組BGLB肉湯管中,每管接種1個菌落。置于培養箱內 36℃±1℃ 培養 24h~48h后觀察產氣情況。凡產氣窗內有氣泡者為陽性管。

          7. 結果報告:經最后證實為大腸菌群陽性的管數比例(該比例數適用于該批次5個樣品的平板上的菌落數計算)乘以上述5.菌落數選擇中計數的平板菌落數,再乘以稀釋倍數,即為每 g(mL)樣品中大腸菌群數。例:10-3樣品稀釋液1mL,在 VRBA 平板上有100個典型和可疑菌落,挑取其中10個接種BGLB肉湯管,證實有6個陽性管,則該樣品的大腸菌群數為:100×6/10×103/g(mL)= 6.0×104CFU/g(mL)。若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無菌落生長,則以小于1乘以最低稀 釋倍數計算。



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